Integrated Platform for EV Analysis

提取和分析胞外體的整合平台 : SEC (qEV Columns 胞外體提取管柱) + TRPS (qNano Gold 奈米粒徑/濃度/界達電位分析儀) + Izon Science Reagent Kit (反應試劑組)

胞外體是具有一系列重要的生物功能的膜性介質物並為目前熱門的研究主題。醫療診斷迫切需要胞外體生物標誌呈現提供的詳細資料, 而胞外體也被開發為治療劑; 其訊息量測的標準化對於胞外體作為生物標誌和治療劑來說是一個基本的需求


胞外體微小的體積和異質性還暴露了大多數分析技術的限制, 包含共軛焦顯微鏡 (confocal microscope)、流式細胞技術 (flow cytometry)、動態光散射 (DLS)、奈米顆粒追蹤技術 (NTA) 和電子顯微鏡 (EM)
 
在此, 我們介紹 Izon Science 完整專業的細胞外囊泡提取分析的整合平台, 此平台創造的突破將使胞外體的領域取得進展並達成其潛能 :

Izon Science 整合了尺寸排阻色譜技術 (Size Exclusion Chromatography, SEC) 和可調式電阻脈衝感應技術 (Tunable Resistive Pulse Sensing, TRPS) 搭配可更增加 TRPS 技術的穩定性所開發的反應試劑組 (Izon Science Reagent kit), 可完整、簡單、快速、高精度的提取與分析胞外體

      

全面的分析 EV 胞外體的整套方案 : SEC + TRPS + Izon Science Reagent Kit

SEC (qEV Columns 胞外體提取管柱) 是一個可保留胞外體完整性的提取方式。 滴定的過程簡單、快速、有效且是提供標準的胞外體代表集合的唯一方法。例如 qEVoriginal column 可滴入 500μL 的樣品或 qEVsingle column 可滴入 100-150μL 的樣品
   

TRPS (qNano Gold 奈米粒徑/濃度/界達電位分析儀) 提供 Particle-by-Particle 的尺寸分佈圖, 是一個功能完整且經由標準品校正的奈米生物顆粒分析方法, 精度可達 1 nm 而最小尺寸為 40 nm; 同步可提供正確的粒徑尺寸與數量濃度分佈圖和每個單一顆粒的帶電性 (Zeta potential)
         

Izon Science Reagent kit (反應試劑組) 在 TRPS 技術的分析時提供更準確的量測過程, 主要為消除外界的汙染物質和儀器的材質所引起的電性干擾包含 : 潤濕  (Wetting Protocol) 和塗佈 (Coating Protocol) 大約共需要20分鐘, 可應用於絕大部分的 EV 樣品 : 血液衍生物 (血清, 血漿)、唾液、尿液、細胞培養液、腦脊隨液

   

首先, qEV Columns 的胞外體提取過程大約需要15分鐘, 經過 qEV 的樣品於 TRPS 的原理分析時包含使用 Izon Reagent kit 大約需要40分鐘, 之後即可快速的進行資料分析並產生 PDF 報告, 經過練習後一般可於1 小時內完成全部的過程

腦脊髓液 (cerebral spinal fluid, CSF) 與血漿樣本的提取分析

將 CSF 與血漿樣本經由 qEVoriginal column 提取後的餾分 (Fractions) 以電解質溶液 (ex: PBS) 稀釋1:10後再使用 TRPS 技術分析。從 qEV columns 沖提出 Fraction 7-9 的 CSF 和血漿的胞外體再以 Fraction 8 的血漿和 Fraction 9 的 CSF 做鑑定如下:

 

有些胞外體會在 Fraction 10 沖提出現, 但此餾分通常包含更多的污染性蛋白質所以通常捨棄不用。典型的粒徑分佈和顆粒濃度資料經由 TRPS 技術分析如下:

 

在某些胞外體濃度低的生物樣品的情況下, qEV columns 提取過程前後可能會額外需要使用包含旋轉過濾器 (spin filter) 的濃縮步驟


Izon Science 整合的 SEC + TRPS + Reagent Kit 平台方案對於分析胞外體是一個非常有效的方法, 也是一種非平均值的方法,非常適用於有多重粒徑分佈性的顆粒的樣品, 此整合平台的方案亦是臨床研究使用的唯一途徑


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